Nat Neurosci:对小鼠,非人类灵长类动物和人类中功能不同的中间神经系统进行病毒操作

2022-01-03 00:44:55 来源:
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大规模的基因表达组学术研究正在迅速推断出在特定肝细胞型式中都何时何地表达与神经精神疾病无关的蛋白质。理解和病患这些疾病的方法有将所需凋亡和操纵特定突触狂犬病性的方法有。因此,在非生命体灵长类类动物和生命体中都接触这些群体已愈发至关重要。重新分配刚毛无关狂犬病(rAAVs)是在神经该系统中都开展蛋白质发送到的首选方法有,对特定的突触小团体未内在的功能性。该系统的弱化子发现并未通过允许以单肝细胞分辨率开展基因表达组和表观遗传学学术研究的技术的最新发展而得到较慢。但对于弱化子考虑的搜索生活空间仍然很小。为了之外我们的弱化子考虑,原作者考虑专门学术研究Scn1a的基因表达形势,Scn1a是在不同突触小团体中都表达的蛋白质,其破坏与严重的发作病无关。结合用做易位易位染色质脱氧核糖核酸(scATAC-seq)数据的单肝细胞测定与包涵类群的多肽倾向性融为一体,原作者在该蛋白质临近提名了十个候选基因表达多肽。原作者考虑到了三种弱化子,共同凋亡表达Scn1a的突触小团体的丰富性。其中都,一种特定的短基因表达多肽必须将狂犬病表达限制为表达PV的皮质中都间突触(PV cIN)。

方法有:四名人会(两名异性恋/两名女性,比率22-57岁)接受了一项外科动手术,切除了大人脑组织(丘人脑和脑)以病患细菌性发作。在所有的病症中都,每个大多数人都曾接受过一次初步的动手术,放置硬鞘下和/或深度电极开展颅内受控,以考虑到发作复发的位置。从海马和丘人脑自取300μm切口,在海马切口中都,狂犬病的凋亡是基底鞘亚区。在接种狂犬病后7~14d对指导的人切口开展电生理日志。将指导的人切口转到到日志室。对固有鞘和放电适应性开展分析。大鼠分别保持在17.8–26.1℃和30–70%的宏观光照和环境温度周围内。这些参数被密切受控和遏制在啮齿类动物居住地室。从麻省理工学院(MIT)的小团体中都授予了一只雌性除此以外狨猴(6岁左右)。成年(2岁)雄性猕猴(macacamulatta)来自南加州大学戴维斯分校的南加州国家政府灵长类类动物学术研究中都心。在小鼠人脑切口机(Zivic Instruments)上开展齿状切口,并在冰冷的人工人脑脊髓液(ACSF)中都鉴定V1皮质。经过处理后,使用使用Nova-Seq S2 100循环试剂盒(Illumina)开展脱氧核糖核酸。

结果:在但会或临床发展意味着(以外Dret病症)健康检查回路开花结果的最初动态的主要障碍是,在不使用转蛋白质类动物的意味着无法转至特定的肝细胞型式。即使采行复杂的遗传策略,年轻的PV cIN也很难被选为化学合成。考虑到它们的丰度(它们代表所有抑制性cIN的40%)并且出现得相对于较晚。更相当多地说,在本学术研究中都考虑到的弱化子获取了具比如说临床意义的突触小团体的次访问种系统。最相比的是,这些弱化剂可以通过蛋白质医学上或调节突触活性而潜在地用做减轻Dret病症的强盛患者。原作者归功于发散和身体注射可用做适当的狂犬病发送到到大人脑。通过发散注射,可能会提升局灶性发作,PFC功能障碍或海马记忆障碍。相比之下,该系统性替换成狂犬病可用做所需全面干涉的意味着,例如,有错局限性发作复发或精神病和神经冠心病疾病。原作者的学术研究表明,对基因表达元素的宽松鉴定为病患环境中都特定肝细胞型式的获自取获取了路线图。重要的是,归功于我们的弱化子考虑方法有可提倡到其他蛋白质。总体而言,我们发现了一组七个针对不同突触小团体和中都枢神经该系统周围具独特抗体的弱化剂。即使采行了宽松的标准(对远距离群体的功能性> 90%),我们的方法有仍具许多现代的几率(> 20%)。此外,正如总体倾向的多肽所预报的那样,原作者验证的弱化同构在以外生命体在内的所有类群中都被证明具同等的功能性和适当性。

Vormstein-Schneider, D., Lin, J.D., Pelkey, K.A. et al. Viral manipulation of functionally distinct interneurons in mice, non-human primates and humans. Nat Neurosci (2020).

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